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編號(hào)：

名稱： 轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞結(jié)合支架修復(fù)退變椎間盤技術(shù)

領(lǐng)域： 生物醫(yī)用

成果形式：

投資額： 萬(wàn)

案例數(shù)： 2-5家

技術(shù)階段： 小批量階段

合作方式： 技術(shù)許可,其他

已成功構(gòu)建Ad-GDF-5和Ad-GFP；已成功構(gòu)建小腸粘膜下層和殼聚糖－聚己酸內(nèi)酯支架；

目前已完成動(dòng)物椎間盤退變模型的制作，間充質(zhì)干細(xì)胞的提取，分離，培養(yǎng)和鑒定；

已制備轉(zhuǎn)基因MSCs，完成轉(zhuǎn)基因MSCs的細(xì)胞特性，其和支架之間的相互影響。

主要技術(shù)指標(biāo)：

（1）、重組腺病毒Ad-GDF-5以及對(duì)照空載腺病毒Ad-GFP制備的檢測(cè)采用PCR、熒光顯微鏡、western-blot方法；

（2）、采用相應(yīng)物理化學(xué)工藝處理材料制備小腸粘膜下層和殼聚糖－聚己酸內(nèi)酯支架，采用電子顯微鏡觀測(cè)；

（3）、間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的采集，培養(yǎng)和鑒定，運(yùn)用特定抗體采用流式細(xì)胞術(shù)鑒定；

（4）、用Ad-GDF-5和Ad-GFP分別轉(zhuǎn)染MSCs得到轉(zhuǎn)基因MSCs，熒光顯微鏡、熒光計(jì)數(shù)器及western-blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染情況；

（5）、轉(zhuǎn)基因的MSCs復(fù)合支架的體外培養(yǎng)，電子顯微鏡、DNA含量檢測(cè)等方法研究細(xì)胞支架復(fù)合情況；

（6）、構(gòu)建動(dòng)物退變椎間盤模型，大體及切片染色檢測(cè)退變情況；

（7）、體內(nèi)試驗(yàn)部分主要通過(guò)大體觀察、組織切片、原位免疫熒光、western-blot等方法檢測(cè)。

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